3. Приготування гістологічних препаратів, Питання 1. Введення в курс гістології, Гістологія людини, Лекції 1 курс, Medkurs.

09.09.2015

3. Приготування гістологічних препаратів

бути достатньо тонким і прозорим для вивчення його під мікроскопом в прохідному світлі;

бути контрастним, тобто досліджувані структури повинні під мікроскопом чітко визначатися;

препарати для світлової мікроскопії повинні довго зберігатися і використовуватися для повторного вивчення.

Ці вимоги досягаються при приготуванні препарату.

Виділяють наступні етапи приготування гістологічного препарату.

забір матеріалу повинен проводитися якомога раніше після смерті або забою тваринного, а при можливості від живого об’єкта (біопсія), щоб краще збереглися структури клітини, тканини чи органу;

паркан шматочків повинен проводитися гострим інструментом, щоб не травмувати тканини;

товщина шматка не повинна перевищувати 5 мм, щоб фіксуючий розчин міг проникнути в товщу шматочка;

обов’язково проводиться маркування шматочка (зазначається найменування органу, номер тваринного або прізвище людини, дата забору і так далі).

Фіксація матеріалу необхідна для зупинки обмінних процесів і збереження структур від розпаду. Фіксація досягається найчастіше зануренням шматочка в фіксують рідини, які можуть бути простими спирти і формалін і складними розчин Карнуа, фіксатор Цинкера та інші. Фіксатор викликає денатурацию білка і тим самим припиняє обмінні процеси і зберігає структури в їх прижиттєвому стані. Фіксація може досягатися також заморожуванням (охолодженням в струмені2. рідким азотом та інші). Тривалість фіксації підбирається дослідним шляхом для кожної тканини або органу.

Заливка шматочків в ущільнюючі середовища (парафін, целлоидин, смоли) чи заморожування для подальшого виготовлення тонких зрізів.

Приготування зрізів на спеціальних приладах (мікротоми або ультрамикротоме) з допомогою спеціальних ножів. Зрізи для світлової мікроскопії приклеюються на предметні скла, а для електронної мікроскопії — монтуються на спеціальні сіточки.

Забарвлення зрізів або їх контрастування (для електронної мікроскопії). Перед фарбуванням зрізів видаляється ущільнююча середовище (депарафинизация). Забарвленням досягається контрастність досліджуваних структур. Барвники поділяються на основні, кислі та нейтральні. Найбільш широко використовуються основні барвники (зазвичай гематоксилін) і кислі (еозин). Нерідко використовують складні барвники.

Просвітлення зрізів (у ксилолі, толуолі), укладання смоли (бальзам, полістерола), закриття покривним склом. Після цих послідовно проведених процедур препарат може вивчатися під світловим мікроскопом.

Для цілей електронної мікроскопії в етапах приготування препаратів є деякі особливості, але загальні принципи ті самі. Головна відмінність полягає в тому, що гістологічний препарат для світлової мікроскопії може тривало зберігатися і багаторазово використовуватися. Зрізи для електронної мікроскопії використовуються одноразово. При цьому спочатку цікавлять об’єкти препарату фотографуються, а вивчення структур проводиться вже на электронограммах.

З тканин рідкої консистенції (кров, кістковий мозок та інші) виготовляються препарати у вигляді мазка на предметному склі, які також фіксуються, фарбуються, а потім вивчаються.

З ламкого паренхіматозних органів (печінка, нирки та інші) виготовляються препарати у вигляді відбитка органу: після розлому або розриву органу, до місця розлому органу прикладається предметне скло, на яке приклеюються деякі вільні клітини. Потім препарат фіксується, забарвлюється і вивчається.

Нарешті, з деяких органів (брижа, м’яка мозкова оболонка) або з пухкої волокнистої сполучної тканини виготовляються плівкові препарати шляхом розтягування або роздавлювання між двома стеклами, з наступною фіксацією, забарвленням і заливкою в смоли.

Короткий опис статті: гістологія лекції Медичний сервер Medkurs.RU. Стаття: 3. Приготування гістологічних препаратів, Розділ: Запитання 1. Введення в курс гістології медицина, лікування за кордоном, медичне обладнання, Лекції 1 курс

Джерело: 3. Приготування гістологічних препаратів — Питання 1. Введення в курс гістології — Гістологія людини — Лекції 1 курс — Medkurs.ua — медичний сервер

Також ви можете прочитати